Née à Clèves, petit duché du Nord du Saint-Empire romain germanique, Anne était la fille du duc Jean III de Clèves et de la duchesse Marie de Juliers-Berg. Son père et son frère s’étaient tous deux convertis au luthéranisme, religion réformée.
Son portrait, réalisé par Hans Holbein le Jeune, artiste d’origine allemande devenu peintre à la cour d’Angleterre, la montre à mi-corps, de face, impassible, les mains sagement croisées. Sa silhouette se détache sur un fond vert foncé, créant un espace indifférencié, sans profondeur. Une lumière égale baigne le tableau, rendant frappante la description objective de son costume. Une symétrie presque parfaite ajoute à l’étrangeté de cette effigie esthétisée à l’extrême.